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来源:2025-03-13 14:57:11
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血浆蛋白结合率(PPB)是衡量药物在血浆中与蛋白质结合的比例。平衡透析法的操作复杂度因实验条件和设备而异,但总体而言,它被认为是一种相对简单且经典的实验方法。以下是一些关于平衡透析法操作的关键点:
操作简单:
平衡透析法在测定药物血浆蛋白结合率时具有操作简单的优点。它基于药物结合的平衡原理,通过透析膜将蛋白质溶液与缓冲液分隔开,建立在两者之间的平衡状态,只有分子量小的药物小分子可以通过。
a)温度和pH控制:实验可以在37℃下进行以模拟体内条件,并且可以在二氧化碳控制的培养箱中进行以控制pH值,这增加了对实验条件的控制,但并不显著增加操作的复杂性。
b)平衡时间:平衡透析法的一个缺点是达成平衡时间较长。根据不同的实验条件和药物特性,透析可能需要数小时到过夜的时间以达到平衡。这可能增加了实验的总时间,但并不一定增加操作的复杂性。
设备成本:
平衡透析法的设备成本相对较低,这使得它在成本效益方面是一个有吸引力的选择。
高通量测试:
目前,平衡透析法已有96孔板的高通量测试形式,可以实现同时测试大量候选药物的蛋白结合率,这提高了实验的效率。
非特异性结合:
平衡透析法使用Teflon镀层的平衡装置,能大大减少药物的非特异性结合,得到更精确的结果。
综上所述,平衡透析法虽然在操作上相对简单,但由于需要较长的平衡时间,可能会使实验的总时间较长。然而,它在控制实验条件、设备成本和高通量测试方面具有优势,因此对于需要精确测定血浆蛋白结合率的实验来说,它仍然是一个合适的选择。
ICE有平衡透析法(equilibrium dialysis, ED)、超滤法(ultrafiltration, UF)和超速离心法(ultracentrifugation,UC)等方法,可以根据不用化合物类型来推荐相对应的方法,为早期化合物筛选提供更高效,经济的服务。
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