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    细胞迁移和侵袭检测

    Transwell迁移实验及其类似迁移(趋化实验和侵袭实验,是研究各种生物学背景下细胞运动性和侵袭性的重要工具。这些实验利用Transwell插入物,它由上下两个室组成,中间隔着一个多孔膜。这些实验的基本原理是观察和测量细胞通过这个膜的运动,提供细胞在不同条件下行为的检测

    迁移实验

    原理:这种实验测量细胞通过多孔膜的一般迁移能力。细胞被种植在上层室,追踪它们向含有培养基的下层室的移动。培养基中可能含有营养物质,但不包含特定的趋化因子。

    方法:在设定的孵育期后,对迁移到膜下层的细胞进行固定、染色和定量。这提供了衡量细胞固有运动能力和对周围环境反应的指标。

    趋化性试验

    原理:Transwell迁移实验的一个专门版本,趋化实验特别评估细胞对存在于下层室的化学信号,即趋化因子的定向移动。

    方法:与Transwell迁移实验类似,细胞被放置在上层室。然而,下层室中填充了含有趋化因子的培养基。对细胞向这个趋化因子的定向迁移进行定量,从而可以研究趋化性——这是免疫反应和癌症转移中的一个重要过程。

     

    趋化实验在药物发现中用于测量细胞对化学刺激物的反应性迁移。细胞被放置在带有多孔膜的96孔板中,其向趋化因子的移动被定量化,通常通过ATP含量来实现。这允许评估可能影响这一过程的潜在药物化合物,这在炎症和肿瘤学领域至关重要。实验的具体细节,如细胞类型和趋化因子,可以极大地影响结果。

     

     

     

    趋化实验针对不同靶点:上图展示了不同药物对针对特定趋化因子受体的趋化实验的影响。药物RS 504393,一种选择性的CCR2拮抗剂,被用于THP-1细胞的测试。AZD2098,一种强效且选择性的CCR4拮抗剂,被评估在CD4+ T(reg)细胞上。CCR8拮抗剂AZ084被用于H9细胞的测试。最后,GPR84拮抗剂GLPG1205被评估在中性粒细胞上。细胞迁移百分比与药物浓度相对应,提供了这些药物在调节细胞趋化中药效的检测

    入侵检测

    原理:侵袭实验扩展了细胞迁移的概念,通过在多孔膜上引入模拟细胞外基质(ECM)的屏障来实现,例如Matrigel。细胞必须首先降解这个ECM屏障,然后才能通过孔隙进行迁移,模拟组织侵袭的过程。

    方法:细胞被接种在涂有类似细胞外基质屏障的上层室中。在孵化后,评估它们穿透这个基质并迁移到下层室的能力。这种实验特别适用于研究癌细胞的侵袭性以及抗转移治疗的有效性。

     

     

    应用检测

    癌症研究:这三种实验对于理解癌细胞行为的不同方面都有着重要的价值,从基本的运动性到复杂的侵袭机制。

    免疫学:特别是趋化实验,对于研究免疫细胞向感染部位或肿瘤环境的迁移至关重要。

    药物开发:这些实验被广泛用于评估治疗性化合物对细胞运动、趋化性和侵袭性的影响,有助于开发抗癌和抗炎药物。

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