KRAS

大鼠肉瘤（RAS）是第一个被发现的人类肿瘤基因，也是人类癌症中最常见的突变癌基因。RAS基因被认为是肿瘤中最常见的突变基因之一，存在于大约30%的人类癌症中，其中95%是KRAS突变。KRAS突变在各种恶性肿瘤中以不同的比例发生。大多数KRAS突变破坏了KRAS的内在GTP酶活性，导致KRAS的激活无法将GTP水解为GDP。这些突变导致Ras蛋白的持续激活，持续激活下游信号通路，最终驱动不受控制的细胞增殖，抑制凋亡，增强侵袭性，促进血管生成。这些致癌机制有助于各种癌症的发展和进展，使KRAS成为癌症研究和治疗干预的重要靶点。

ICE Bioscience提供了全面的解决方案，包括蛋白质纯化、蛋白质相互作用测定、SPR KRAS WT/突变体结合测定和细胞增殖测定。我们目前拥有广泛的KRAS突变变体（G12D/C/V/R/S、G13D/C、Q61H），以及RAS家族的另外两个成员，HRAS和NRAS。我们稳定的酶学、生物物理学和细胞学检测旨在促进药物发现工作并加快药物开发过程。

蛋白纯化

在ICE Bioscience，我们提供全面的重组蛋白，包括各种KRAS突变变体（G12D/C/V/R/S、G13D/C、Q61H）、HRAS、NRAS，以及上游和下游相关蛋白，如SOS1和cRAF。每批蛋白都经过严格的活性验证，以确保纯度和功能性。我们还提供负载GDP的蛋白，以满足广泛的实验要求。

KRAS G12D_GDP蛋白数据表。（A） SDS-PAGE数据。（B） SEC-HPLC数据。（C） HTRF活性测定验证数据。

蛋白-蛋白相互作用

KRAS可以与鸟嘌呤核苷酸交换因子（GEF）如SOS1和SOS2相互作用。活化的KRAS还可以与下游cRAF结合，启动下游信号通路。在ICE Bioscience，我们利用HTRF方法评估KRAS与SOS1、SOS2和cRAF结合的相互作用，从而深入了解小分子对KRAS的抑制作用。

（A） KRAS/RAF结合试验原理。（B）使用HTRF方法基于HTRF检测KRAS G12D和cRAF结合的化合物抑制。（C）基于HTRF的KRAS G12C和SOS1结合的化合物抑制检测。（D）基于HTRF检测MRTX1133对KRAS G12C和SOS2结合的抑制作用。

核苷酸交换实验

KRAS与鸟嘌呤核苷酸交换因子SOS1结合后，GDP被释放，使GTP与KRAS结合，随后激活它。在ICE Bioscience，我们采用两种方法来评估小分子对KRAS NEA的抑制作用。第一种方法利用荧光标记的BODIPY-GTP，由SOS1催化，与标记的KRAS结合。KRAS与BODIPY-GTP之间的相互作用采用TR-FRET方法进行评估。第二种方法涉及在SOS1的影响下，标记KRAS从不活跃的GDP状态过渡到活跃的GTP状态。激活的GTP结合KRAS然后与下游标记的cRAF相互作用。通过HTRF方法测量gtp结合KRAS与cRAF之间的相互作用，间接反映KRAS交换的程度。

两种KRAS突变体核苷酸交换活性的小分子抑制评价。（A） KRAS和BODIPY-GTP核苷酸交换TR-FRET测定原理的示意图。（B）使用KRAS和BODIPY-GTP核苷酸交换TR-FRET方法检测MRTX1133对KRAS G12D_GDP/G12V_GDP中核苷酸交换的抑制作用。（C） KRAS_GDP、GTP和CRAF核苷酸交换HTRF测定原理的示意图。（D）使用KRAS_GDP、GTP和cRAF核苷酸交换HTRF方法检测MRTX1133对KRAS G12D_GDP/G12V_GDP中核苷酸交换的抑制作用

SPR结合实验

表面等离子体共振（SPR）用于量化分子的结合亲和力和动力学。ICE Bioscience已经建立了SPR方法来评估小分子与各种KRAS突变变体的结合，涵盖了GDP和GTP结合状态。

(A) MRTX1133与KRAS WT、G12C、G12D和G12V相互作用的SPR传感器图和拟合。(B) SPR传感器图和拟合图显示了BI-2865与KRAS WT、G12C、G12D和G12V之间的相互作用，这些蛋白装载了GDP。

BaF3 细胞增殖实验

Ba/F3细胞是一种小鼠前b细胞系，其独特的特点是依赖于小鼠白细胞介素-3 （mIL3）刺激进行体外增殖。酪氨酸激酶在这些细胞中几乎不存在，这使得它们成为建立表达酪氨酸激酶受体的稳定转染物的理想背景。ICE Bioscience共获得了33个Ba/F3稳定的与KRAS突变相关的转染细胞系，满足了广泛的研究需求。凭借我们专业的Ba/F3检测开发团队，我们提供全面的Ba/F3细胞系生成服务，为您的特定细胞系需求提供一站式解决方案。我们还提供了针对KRAS靶点的cell Panel。